Пчелиный яд представляет собой секрет особой железы пчел, используемый ими через жалоносный аппарат при защите гнезда, потомства и в случаях самообороны. Таким образом, пчелы успешно отражают нападение не только насекомых, но и крупных животных. Однако пчелиный яд не действует на змей, жаб, черепах, ежей, медведя, цаплю. В заметных количествах яд у пчел образуется и накапливается с 6—7-дневного возраста, а наиболее активно в возрасте 10—18 дней.
Химический состав. В пчелином яде найдено 9 белковых веществ, в том числе 2 фермента — фосфолипаза А2 (молекулярная масса 15 800) и гиалуронидаза (молекулярная масса 50000). Значительная часть сухих веществ яда представлена пептидами, из которых наиболее важными являются мелитин (состоит из 26 аминокислот), апамин (получен также синтетически), пептид 401, секапин, дофамин, норадреналин. Аминокислот обнаружено 18, из аминов найден гистамин. Липоидная часть пчелиного яда — жиры и стерины — не изучены. Из углеводов выявлены глюкоза, фруктоза. Жирные кислоты представлены большей частью муравьиной кислотой. Среди зольных элементов преобладает магний. Кроме него, имеется калий, кальций, железо, медь, цинк, марганец, фосфор, сера, хлор, йод. Прочих компонентов в пчелином яде 13 (холин, ацетилхолин, ароматические вещества и нерасшифрованные соединения). Всего в его составе выявлено 50 веществ и зольных элементов.
В свежем пчелином яде содержится от 30 до 50, в среднем около 40% сухих веществ.
Физические и химические свойства яда и его компонентов. Пчелиный яд — прозрачная, ароматичная, желтоватого цвета жидкость. Вкус его горький, жгучий; плотность 1,085—1,131, в среднем 1,11г/см3, рН водного его раствора 1:100 колеблется от 4,5 до 5,5. На воздухе пчелиный яд быстро высыхает. Сухой яд гигроскопичен, легко растворяется в воде и водно-глицериновых смесях, труднее в водно-этанольных смесях и кислотах, например муравьиной. Некоторое его количество растворяется в косточковых маслах. Высыхая, яд теряет ароматические вещества и около 25% жирных кислот. В 0,1 н кислоте и щелочи пчелиный яд за 24 ч не разрушается. При более высоких концентрациях кислоты и щелочи устойчивость его к их воздействию снижается, но разные компоненты яда разрушаются при этом в неодинаковой степени.
Так, в 0,5 н серной кислоте ферменты яда, разведенного водой в соотношении 1:1000, еще сохраняют свою активность. Щелочь же в этих условиях разрушает и их, и мелитин уже за 2 ч.
Концентрированные щелочи и кислоты (азотная, серная), этиловый спирт, окислители, а также солнечный свет разрушают яд.
В частности, мелитин яда довольно быстро, а его ферменты медленнее разрушаются 0,1 н раствором перманганата калия.
Низкие температуры и замораживание не оказывают влияние на компоненты пчелиного яда, а повышенные температуры инактивируют и разрушают их.
Например, при 60° С заметно инактивируется фосфолипаза яда, разведенного водой в соотношении 1:1000; при 100°С за 15 мин почти полностью разрушается гиалуронидаза; при 110° С через 1—2,5 ч становятся неактивными оба фермента, через 6 ч заметно, а при 150° С через 15 мин полностью распадается мелитин.
Биологические свойства. Пчелиный яд действует на центральную и периферическую нервную систему, сердечно-сосудистую систему, кроветворение, на плазму крови и ее форменные элементы, на гипофиз, надпочечники, печень и некоторые другие органы. Компоненты пчелиного яда активно влияют на структуру и функцию клеточных элементов и обменные процессы, протекающие в клетках (показано на клетках нервной, мышечной, соединительной и покровной тканей). Пчелиный яд влияет на различные ферментативные процессы, протекающие в клетках и их органеллах, и передачу нервного импульса, а также на проницаемость клеточных мембран.
Действие пчелиного яда на теплокровных зависит от количества ужалений, места его введения, путей распространения и индивидуальной чувствительности организма. Небольшое (до 2 мг) количество яда при ужалениях вызывает местную реакцию. У здорового человека (без аллергии к яду) эта реакция выражается в ощущении жгучей боли, покраснении места ужаления, локальном повышении (на 2—6° С) температуры, отеке. По истечении нескольких часов или дней все эти симптомы в большинстве случаев проходят бесследно.
В терапевтических дозах пчелиный яд стимулирует работу гипофиза и надпочечников, органов кроветворения, сердечную деятельность. Расширяя мелкие артерии и капилляры, он улучшает кровоснабжение тканей и обмен веществ в них. Яд благотворно влияет на общее состояние организма, сон, аппетит, оказывает противовоспалительное действие, смягчает и устраняет боли, понижает вязкость и свертываемость крови.
При попадании яда сразу в кровяное русло или. одновременном введении 20—60 мг яда (100—300 ужалений) наблюдается общее отравление организма. При этом учащаются пульс (130—140 сокращений в 1 мин) и дыхание (27—29 в 1 мин), повышается (до 38° С) температура, на теле выступает сыпь, развиваются головная боль, недомогание, озноб. В более тяжелых случаях отмечаются слюно- и потоотделение, рвота, понос, снижение кровяного давления, сонливость, потеря сознания, бред, судороги, удушье. У лиц с аллергией к пчелиному яду симптомы общего отравления развиваются уже при дозе его 0,2 мг. Смертельной для человека дозой считают 100 мг яда и более (500 ужалений). Смерть наступает обычно от нарушения работы мозга и удушья из-за паралича дыхательного центра.
В разведении от 1:100 до 1:1000 пчелиный яд обнаруживает противомикробные свойства по отношению к микроорганизмам 17 видов. Его противомикробная активность не утрачивается и после 10-минутного нагревания при 100° С.
Связь между составом и свойствами пчелиного яда. Биологическая активность пчелиного яда обусловлена пептидами, ферментами, гистамином, ацетилхолином, муравьиной кислотой и магнием. Пептиды, например, оказывают разностороннее действие на нервную, сердечно-сосудистую и некоторые другие системы организма, а также на кровь, причем характер действия зависит от их количества. Терапевтическая активность и токсичность пчелиного яда обусловливаются в основном мелитином и отчасти апамином. От последнего, в частности, зависит нейротоксичность яда — нарушение внутренней структуры клеток мозга. Пептид 401 может вызывать воспаление и прекращать его. Противовоспалительные свойства присущи норадреналину и дофамину. Терапевтическое и токсическое действие яда в немалой степени зависит и от фосфолипазы А. Она снижает активность антигенов. Гиалуронидаза разрушает соединительную ткань и повышает ее проницаемость для компонентов пчелиного яда. Гистамин и ацетилхолин влияют на состав и свойства крови, первый к тому же участвует в формировании местной реакции организма. Такую реакцию на яд, кроме того, вызывают муравьиная кислота и магний. Органические кислоты придают яду противомикробные свойства.
Вопросы технологии и хранения.Получение яда. Существует несколько способов отбора яда у пчел. Для этого насекомое каким-либо образом возбуждают и заставляют выпускать яд или жалить различные среды (вата, фильтровальная бумага, животные перепонки, стеклянные пластинки). Для механического возбуждения пользуются специальным пинцетом, которым сдавливают грудку пчелы. Можно возбуждать пчел, действуя на них парами диэтилового эфира, хлороформа или электрическим током. На принципе возбуждения их электротоком разработан ряд приспособлений для сбора значительных количеств яда (например, СЭРП-5). Проползая по специальной рамке такого прибора, пчела попадает под постоянное или пульсирующее электрическое напряжение, возбуждается и выпускает яд на стеклянную подложку, защищенную от загрязнений сеткой из нейтрального материала (нейлоновая или другая ткань). Яд этот затем собирают с помощью капиллярных пипеток, смыванием или растворителем (дистиллированная вода, масла), накапливают в нем или после подсыхания снимают с подложки механическим способом. От одной пчелы в зависимости от ее возраста и условий отбора яда можно получить его 0,2—0,8 мг. Менее чистый продукт получают экстрагированием водой измельченных органов с ядовитой железой или тела пчелы.
При интенсивном отборе летом пчелиного яда биологические показатели и хозяйственно-полезная деятельность пчелиной семьи могут снизиться.
Обработка и хранение. Никакая другая первичная обработка пчелиного яда, кроме высушивания, недопустима. Сушат яд при температуре до 40° С в отсутствие прямого солнечного света.
В стерильных условиях без доступа воздуха (под слоем растительного масла) в темноте и при пониженной температуре лечебные свойства пчелиного яда и его растворов сохраняются от нескольких месяцев до нескольких лет, сухого яда — несколько лет. В нестерильных условиях под воздействием микроорганизмов яд, а тем более его водные растворы разрушаются через несколько дней. Хорошо сохраняется пчелиный яд при температуре от —15 до 4-2° С.
Экспертиза подлинности и качества. Пчелиный яд — специфический по происхождению и свойствам продукт. Его фальсификация пока представляется немыслимой. Поэтому экспертиза подлинности пчелиного яда не получила разработки. Экспертиза же качества может быть основана на свойствах мелитина и фосфолипазы А и яда в целом. Предложены биотесты на животных, изолированных органах, тканях и на крови. Качество пчелиного яда как сырья и лекарственных препаратов из него оценивают на предприятиях химико-фармацевтической промышленности и в лабораториях сети Министерства здравоохранения СССР.
Согласно требованиям действующих в РСФСР технических условий, пчелиный яд-сырец должен отвечать определенным требованиям по структуре, цвету, характеру раздражения слизистых оболочек носа, снижению массы при высушивании (не более 12%), нерастворимому в воде остатку (менее 13%), гемолитической активности (до 60 с) и активности фосфолипазы (до 8 мкг).
Применение пчелиного яда. В качестве лечебного средства пчелиный яд, пожалуй, более распространен, чем другие продукты пчеловодства. Он испытан при нескольких десятках заболеваний и во многих случаях дал весьма положительный эффект. Пчелиный яд рекомендуют при ревматических заболеваниях суставов, мышц, сердца, сосудов, воспалительных поражениях периферической нервной системы (радикулиты, невралгии, полиневриты), некоторых заболеваниях глаз (ирит, кератит, склерит), при сосудистых заболеваниях (тромбофлебит, атеросклероз сосудов конечностей), а также при деформирующем спондило-артрозе, спондилите, трофических язвах, гипертонической болезни. Лечение проводится только по совету и под наблюдением врача. Дозы, последовательность их введения, общее количество яда устанавливают в зависимости от характера заболевания и особенностей организма лечащегося.
Наилучшие результаты дает применение пчелиного яда путем непосредственных ужалений. Но живые пчелы не всегда доступны. Поэтому во многих странах стали выпускать очищенные препараты пчелиного яда с точно известной дозой его. Наиболее известны из них апизартрон, форапин, венапиолин, токсапин, вирапин, апифор. Препараты пчелиного яда представляют собой растворы его в воде или масле, линименты, мази, таблетки. Их вводят внутрикожно, подкожно, внутримышечно, в суставы путем инъекций. Наружно применяют путем втирания, ионофореза, фонофореза. Предложены также ингаляции и прием внутрь.
Противопоказания к применению пчелиного яда и его препаратов: аллергия, диабет, глаукома, сепсис, туберкулез легких, пороки сердца, болезнь Адиссона, заболевания крови и органов кроветворения, инфекции, поражения почек, печени, поджелудочной железы и др.
Помощь при отравлении пчелиным ядом. Организм человека обычно блокирует и старается обезвредить яд в месте его внедрения; этому способствует также защитная функция крови, лимфы, печени. Но если количество яда велико или он сразу попадает в кровь, а с ней к нервной системе, то наблюдается общее отравление организма. При попадании яда в глаз часто отмечается сильное воспаление с нагноением. Наиболее тяжело развивается местная реакция при ужалений в губы, язык, миндалины, мягкое нёбо, глотку, гортань и боковую поверхность шеи. При этом может наступить быстрая смерть от механического удушья в результате развития опухоли. Соответствующими средствами защиты таких случаев нужно всемерно избегать.
Чтобы уменьшить поступление яда при ужалений, необходимо как можно быстрее удалить жало, сковырнув его острым предметом (ноготь, нож, пчеловодная стамеска). Для облегчения местной реакции организма место ужаления смазывают медом, соком чеснока, нашатырным спиртом, раствором перманганата калия (1:1000 «марганцовка»), настойкой йода или прикладывают лед. При нарушении дыхания в результате развития опухоли необходимо срочное хирургическое вмешательство. При общем отравлении организма показан постельный режим.
Первая (доврачебная) помощь предполагает также прием повторных доз противоядия в виде специального раствора, который содержит мед, этиловый спирт и аскорбиновую кислоту. Можно давать свежее молоко, кефир. В тяжелых случаях и при аллергии необходима помощь врача.